Государственная фармакопея Республики Беларусь -
Скачать (прямая ссылка):
Лизат амебоцитов, кроме эндотоксинов, может реагировать и с некоторыми в-гликанами. Имеются препараты лизата амебоцитов, не реагирующие с гликана-ми; они изготавливаются путем удаления из лизата амебоцитов G-фактора, реагирующего с гликанами, или ингибированием реакционной системы G-фактора в лизате амебоцитов. Эти препараты могут использоваться для определения эндотоксинов в присутствии гликанов.
(iii) Вода для ИБЭ (вода для испытания на бактериальные эндотоксины)
Вода для ИБЭ - вода для инъекций R или вода, подготовленная с использованием других методов, не дающая реакции с лизатом на пределе чувствительности реагента.
Следующая часть публикуется в информационных целях.
ИСПЫТАНИЕ НА БАКТЕРИАЛЬНЫЕ ЭНДОТОКСИНЫ: РУКОВОДСТВО
1. ВВЕДЕНИЕ
Эндотоксины, источником которых являются грамотрицательные микроорганизмы, являются наиболее распространенной причиной токсических реакций, приписываемых наличию в фармацевтических препаратах пирогенных примесей; их пирогенная активность намного выше, чем у большинства других пирогенных субстанций. Эндотоксины представляют собой липополисахариды. Несмотря на то, что существует незначительное количество пирогенов другой структуры, обычно по отсутствию бактериальных эндотоксинов в продукте можно сделать вывод об отсутствии пирогенных компонентов при условии, что наличие пироген-ных субстанций, не относящихся к эндотоксинам, можно исключить.
Присутствие эндотоксинов в продукте может маскироваться факторами, влияющими на протекание реакции эндотоксинов с лизатом амебоцитов. Поэтому аналитик, желающий заменить требуемое в фармакопейной статье испытание на пирогенность с использованием кроликов тестом на бактериальные эндотоксины, должен продемонстрировать, что этот тест может быть выполнен для данного продукта; при этом может оказаться необходимым выполнение процедуры удаления мешающих факторов.
Как указано в методике испытания на бактериальные эндотоксины, результаты испытания образца можно считать достоверными лишь при наличии следующей информации:
1.1. Должна быть установлена пригодность материала, используемого в испытании. Должно быть гарантировано отсутствие эндотоксинов в воде для ИБЭ и других реагентах, а чувствительность лизата амебоцитов должна быть проверена для подтверждения чувствительности, заявленной производителем.
1.2. В связи с тем, что испытуемый продукт может влиять на ход испытания, чувствительность лизата амебоцитов должна быть определена в присутствии и отсутствии испытуемого продукта. Между двумя значениями чувствительности не должно быть существенной разницы.
В испытании на бактериальные эндотоксины (2.6.14) указаны методы исключения мешающих факторов; в случае наличия мешающих факторов после применения этого метода должно быть проведено дополнительное испытание с целью проверки надежности удаления или нейтрализации мешающих факторов.
В данном разделе поясняются причины требований, предъявляемых в испытании на бактериальные эндотоксины, и даются указания, касающиеся регистрации и интерпретации результатов.
Замена требуемого по частной статье испытания на пирогенность с использованием кроликов на испытание с участием лизата амебоцитов фактически означает использование альтернативного метода анализа и, поэтому, требует вали-
дации; в подразделе 11 приведены некоторые указания, касающихся практических действий в данном направлении.
Ссылка на метод, который следует применять для данного продукта, содержится в соответствующих частных статьях; если метод не указан, применяют метод А. Если используется метод, отличный от предписанного, должно быть продемонстрировано, что применяемый метод является подходящим для данного продукта и дает результат, находящийся в согласии с результатом, получаемым предписанным методом (см. также подраздел 13).
2. МЕТОД
Несмотря на то, что добавление эндотоксинов к амебоцитному лизату в растворе может приводить к помутнению, осаждению или гелеобразованию, для определения конечной точки фармакопейного испытания первого типа использовали лишь образование гелевого сгустка. Преимуществом являлась простота принятия решения о том, выдерживает ли продукт испытание, которое обосновывается наличием или отсутствием гелеобразования, легко определяемыми невооруженным глазом. Количественные методы С, D, E и F были разработаны позже; они требуют более сложного оборудования, но легче поддаются автоматизации для регулярного контроля большого количества образцов одного и того же продукта.
Эндотоксины могут адсорбироваться на поверхности пробирок или пипеток, выполненных из некоторых видов пластика и типов стекла. Могут возникать помехи, обусловленные высвобождением веществ из пластических материалов. Поэтому используемые материалы следует подвергать проверке; последующие партии пробирок или пипеток могут иметь несколько отличающийся состав, и поэтому рекомендуется повторять такие испытания при начале работы с новой партией материала.
Решение об использовании испытания на бактериальные эндотоксины в качестве теста на предельное содержание подразумевает, во-первых, что для испытуемого продукта должна быть определена пороговая концентрация эндотоксина
